Vol. 21 Núm. 4 (2019)
Artículo original

Producción de embriones in vitro en una incubadora portatil de dióxido de carbono y viabilidad in vivo post transferencia a vacas receptoras

Manuel Guido Pérez Durand
Universidad Nacional del Altiplano Puno Perú
Benicio Quispe Villalta
Universidad Nacional del Altiplano Puno Perú
Uri Harold Perez Guerra
Nacional

Publicado 2019-10-25

Palabras clave

  • fertilización,
  • transferencia embrionaria,
  • gestación

Cómo citar

Pérez Durand, M. G. . ., Quispe Villalta, B. . ., & Perez Guerra, U. H. . . (2019). Producción de embriones in vitro en una incubadora portatil de dióxido de carbono y viabilidad in vivo post transferencia a vacas receptoras. Revista De Investigaciones Altoandinas - Journal of High Andean Research, 21(4), 249-256. https://doi.org/10.18271/ria.2019.501

Resumen

El objetivo fue determinar la adición del 5% de dióxido de carbono (CO2) a partir de gránulos efervescentes o gasificado a una incubadora portátil (taper) para evaluar la producción in vitro de embriones de ovocitos aspirados de ovarios de vacas sacrificadas en el matadero y evaluar la viabilidad in vivo a través de la gestación en vacas receptoras. Como incubadora portátil se utilizó un taper de plástico de capacidad de 500 cm3 a la que se acondicionó una válvula para el control de adición de CO2. La maduración se realizó por 24 h, fertilización por 18 h y cultivo de embriones por 7 días en 500 uL de los medios en placas petry e introducidos dentro la incubadora portátil, la misma que se colocó dentro un baño María a 38,5oC. A las 72 h post fertilización se determinó la proporción de cigotos, a los 7 días post cultivo se contabilizo los embriones. Los resultados de fertilización con adición de CO2 a partir de gránulos efervescentes fue 38,28% (103/269), con adición de CO2 gasificado 37,24% (146/392) y control 49,82% (144/289) (p<0,05); para la producción de embriones fue 18,95% (51/269), 19,38% (76/392) y 24,56% (71/289), respectivamente (p>0,05); la tasa de gestación en vacas receptoras fue 38,46% (5/13). En conclusión, es posible producir embriones in vitro de vacunos, utilizando una incubadora portátil de CO2 a nivel de campo.

 

Referencias

  1. Barceló-Fimbres, M., Campos-Chillón, L. F., Mtango, N. R., Altermatt, J., Bonilla, L., Koppang, R., & Verstegen, J. P. (2015). Improving invitro maturation and pregnancy outcome in cattle using a novel oocyte shipping and maturation system not requiring a CO2 gas phase. Theriogenology, 84(1), 109–117. https://doi.org/10.1016/j.theriogenology.2015.02.020
  2. Dong, Y. J., Bai, X. J., Varisanga, M. D., Mtango, N. R., Otoi, T., Rajamahendran, R., & Suzuki, T. (2004). Production of Cloned Calves by the Transfer of Somatic Cells Derived from Frozen Tissues Using Simple Portable CO2 Incubator. Asian-Australasian Journal of Animal Sciences, 17(2), 168–173. https://doi.org/10.5713/ajas.2004.168
  3. Dong, Y. J., Varisanga, M. D., Mtango, N. R., Aono, M., Otoi, T., & Suzuki, T. (2001). Improvement of the culture conditions for in vitro production of cattle embryos in a portable CO2 incubator. Reproduction in Domestic Animals, 36(6), 313–318. https://doi.org/10.1046/j.1439-0531.2001.00308.x
  4. Fujii, A., Kaedei, Y., Tanihara, F., Ito, A., Hanatate, K., Kikuchi, K., … Otoi, T. (2010). In Vitro Maturation and Development of Porcine Oocytes Cultured in a Straw or Dish Using a Portable Incubator with a CO2 Chamber, 624, 619–624. https://doi.org/10.1111/j.1439-0531.2008.01316.x
  5. Garcia, J. C. V., & Padilla, R. P. (2000). Valores gasometricos estimados para las principales poblaciones y sitios a mayor altitud en Mexico. Revista Del Instituto Nacional de Enfermedades Respiratorias, 13(1), 6–13.
  6. Hamdi, M., Lopera-Vasquez, R., Maillo, V., Sanchez-Calabuig, M. J., Núnez, C., Gutierrez-Adan, A., & Rizos, D. (2018). Bovine oviductal and uterine fluid support in vitro embryo development. Reproduction, Fertility and Development, 30(7), 935–945. https://doi.org/10.1071/RD17286
  7. Hansen, P. J. (2006). Realizing the promise of IVF in cattle — an overview, 65, 119–125. https://doi.org/10.1016/j.theriogenology.2005.09.019
  8. Iwayama, H., Ishikawa, H., & Ohsumi, S. (2005). Attempt at In Vitro Maturation of Minke Whale ( Balaenoptera Bonaerensis ) Oocytes Using a Portable CO2 Incubator. J. Reprod. Dev. 51: 69-75 .
  9. J.J. Parrish, J.L.Susko-PArrish , M.L. Leibfried-Rutltdge, E.S. Crister, W.H. Eyestone, and N. L. F. (1986). Bovine in vitro fertilization with frozen-thawed semen. Theriogenology, Vol. 25(Nro. 4), 951–600.
  10. J.M.Lim; B.C. Reggio; R.A. Godke and W. Hansel. (1999). Development of in-vitro-derived bovine embryos cultured in 5% CO2 in air or in 5% O2, 5% CO2 and 90% N2. Human Reproduction, 14(2), 458–464.
  11. Kandil, O. M., Abdoon, A. S. S., Murakami, M., Otoi, T., & Suzuki, T. (1999). New technique, using a portable co2 incubator, for the production of in vitro fertilized egyptian buffalo embryos. Journal of Reproduction and Development, 45(5), 1–6. https://doi.org/10.1007/978-94-007-2229-3_13
  12. Pontes, J. H. F., Silva, K. C. F., Basso, A. C., Rigo, A. G., & Ferreira, C. R. (2010). Large-scale in vitro embryo production and pregnancy rates from Bos taurus , Bos indicus , and indicus-taurus dairy cows using sexed sperm, 74, 1349–1355. https://doi.org/10.1016/j.theriogenology.2010.06.004
  13. Sanches, B. V., Lunardelli, P. A., Tannura, J. H., Cardoso, L., Colombo, M. H., Gaitkoski, D., … Seneda, M. M. (2016). A new direct transfer protocol for cryopreserved IVF embryos. Theriogenology. https://doi.org/10.1016/j.theriogenology.2015.11.029
  14. Suzuki, T., Sumantri, C., Khan, N. H. A., Murakami, M., & Saha, S. (1999). Development of a simple, portable carbon dioxide incubator for in vitro production of bovine embryos. Animal Reproduction Science, 54(3), 149–157. https://doi.org/10.1016/S0378-4320(98)00134-1
  15. Tervit, H. R., Whittingham, D. G., & April, R. (1972). SUCCESSFUL CULTURE IN VITRO OF SHEEP AND CATTLE OVA Agricultural Research Council , Unit of Reproductive Physiology and Biochemistry , * Physiological Laboratory , University of Cambridge, 493–497.
  16. Tsuchiya, K., Tsuda, S., Kamijima, T., Nishimiya, Y., Aoyagi, Y., & Ideta, A. (2013). A simple medium enables bovine embryos to be held for seven days at 4°C. Scientific Reports, 3(1), 1–5. https://doi.org/10.1038/srep01173
  17. Varisanga, M. D., Dong, Y., Mtango, N. R., Fahrudin, M., Wayan, K. K. N. I., & Suzuki, T. (2000). Bovine blastocyts obtained for reconstructed Cytoplast and Karyoplasts Using a simple portable CO2 incubator. Cloninng, 2(4), 167–173.
  18. Walsh, S. W., Williams, E. J., & Evans, A. C. O. (2011). A review of the causes of poor fertility in high milk producing dairy cows. Animal Reproduction Science, 123(3–4), 127–138. https://doi.org/10.1016/j.anireprosci.2010.12.001
  19. Wilson, R. D., Weigel, K. A., Fricke, P. M., Rutledge, J. J., Matthews, D. L., & Schutzkus, V. R. (2005). In Vitro Production of Holstein Embryos Using Sex-Sorted Sperm and Oocytes from Selected Cull Cows. J. Dairy Sci. 88: 776–782.